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帶您了解瓊脂糖凝膠4B

更新時間:2018-03-16      瀏覽次數:1195

帶您了解瓊脂糖凝膠4B

瓊脂糖是線性的多聚物,基本結構是1,3連結的β-D-半乳糖和1,4連結的3,6-內醚-L-半乳糖交替連接起來的長鏈[1-2]  。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強度表示。強度越高,凝膠性能越好。

產品簡介:
瓊脂糖凝膠 4B 是用 4%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒,作為凝膠層析介質使用。

本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。

操作方法:

本產品為傳統的瓊脂糖介質,非特異性吸附低,回收率高,可多次重復使用等特點,用于分子
量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。
1. 裝柱
凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來
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使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于 60cm。裝柱效果可用
染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,
接好管路。
(1) 讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃
度的緩沖液。
(2) 選擇一根一定直徑的柱子,長約 30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積
的 1.15 倍),清洗掉 20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1 的比例)配成勻漿。
不要劇烈攪動,以免攪壞微球。
(3) 將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無
氣泡。
(4) 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使
凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
(5) 打開蠕動泵,讓緩沖液緩慢流過,使柱床穩定。
(6) 用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
2. 平衡
讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和 pH 不變。
3. 上樣
(1) 樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先
做處理,再上樣。
(2) 介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。
(3) 上樣體積約為柱體積的 1~2%,越小分離越好。
4. 洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
5. 再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
6. 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入

保存:

產品應密封貯存在 4℃~25℃(保存溶液為 20%乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在 4℃(20%乙醇)。本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中。

保質期 :5 年。

帶您了解瓊脂糖凝膠4B

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